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動物實驗之前常常需要作適當(dāng)?shù)姆纸M,簡單的方法就是將其標(biāo)記使各組加以區(qū)別, 良好的標(biāo)記方法應(yīng)滿足標(biāo)號清晰、耐久、簡便、適用的要求。清晰持久編號不會使動物之間產(chǎn)生混淆,使動物實驗?zāi)茼樌_展。文末附采購鏈接。實驗中常用的動物編號方法有以下幾種:
(一)染色法
染色法是用化學(xué)藥品在實驗動物身體明顯的部位,如被毛、四肢等處進(jìn)行涂染,以染色部位、顏色不同來標(biāo)記區(qū)分實驗動物,是常用、易掌握的方法。
1. 常用染色劑
(1 )3% ~ 5% 苦/味/酸溶液,可染成黃色。
(2 )0.5% 中性紅或品紅溶液, 可染成紅色。
(3 )2% 硝酸銀溶液,可染成咖啡色(涂染后在可見光下暴露十分鐘)。
(4 )煤焦油酒精溶液,可染成黑色。
2. 染色方法
染色法適用于被毛白色的實驗動物如大白鼠、小白鼠等。
(1 )單色涂染法
單色涂染法是用單一顏色的染色劑涂染實驗動物不同部位的方法。常規(guī)的涂染順序是從左到右、從上到下。左前肢為1 號、左側(cè)腹部2 號、左后肢3 號、頭部4 號、背部5 號、尾根部6 號、右前肢為7 、右側(cè)腹部8 號、右后肢9 號、不作染色標(biāo)記為10 號。此法簡單、易認(rèn),在每組實驗動物不超過10 只的情況下適用。
(2 )雙色涂染法
雙色涂染法是采用兩種顏色同時進(jìn)行染色標(biāo)記的方法。例如用苦/味/酸(黃色)染色標(biāo)記作為個位數(shù),用品紅(紅色)染色標(biāo)記作為十位數(shù)。個位數(shù)的染色標(biāo)記方法同單色涂染法;十位數(shù)的染色標(biāo)記方法參照單色涂染法,即左前肢為10 號、左側(cè)腹部20 號、左后肢30 號、頭部4 0 號、背部50 號、尾根部60 號、右前肢70 號、右側(cè)腹部80 號、右后肢90 號,第100 號不作染色標(biāo)記。比如標(biāo)記第12 號實驗動物,在其左前肢涂染品紅(紅色),在其左側(cè)腹部涂上苦/味/酸(黃色)即可。雙色法色法可標(biāo)記100 位以內(nèi)的號碼。
(3 )直接標(biāo)號法
直接標(biāo)號法是使用染色劑直接在實驗動物被毛、肢體上編寫號碼的方法。實驗動物太小或號碼位數(shù)太多時,不宜采用此方法。
染色法雖然簡單方便,不會給實驗動物造成損傷和痛苦,但是長時間實驗會使涂染劑自行褪色,或由于實驗動物互相嬉鬧、舔毛、摩擦、換毛、糞尿和飲水浸濕被毛等原因,易造成染色標(biāo)記模糊不清,因而染色法對慢性實驗不適用。如果所做慢性實驗只能采用此種染色方法,則應(yīng)注意不斷地補(bǔ)充和加深染色。常用染色劑的毒性對實驗動物的影響也是需要注意的一個問題。
(二) 耳孔法
耳孔法是用打孔機(jī)直接在實驗動物的耳朵上打孔編號,根據(jù)打在動物耳朵上的部位和孔的多少,來區(qū)分實驗動物的方法。用打孔機(jī)在耳朵打孔后,必須用消過毒的滑石粉抹在打孔局部,以免傷口愈合過程中將耳孔閉合。耳孔法可標(biāo)記三位數(shù)之內(nèi)的號碼。另一種耳孔法是用剪刀在實驗動物的耳郭上剪缺口的方法,作為區(qū)分實驗動物的標(biāo)記。
優(yōu)點:成本低、操作快。缺點:引起疼痛、易脫落、小鼠耳朵小不易區(qū)分
(三)烙印法
烙印法是直接把標(biāo)記編號烙印在實驗動物身體上的方法,尤如蓋印章一樣。烙印方法有兩種,對犬等大動物,可將標(biāo)記號碼烙印在其皮膚上(如耳、面、鼻、四肢等部位),對家兔、豚鼠等動物,可用數(shù)字號碼鉗在其耳朵上刺上號碼;烙印完成后,傷口涂抹酒精黑墨等顏料,即可清楚讀出號碼。烙印法對實驗成績動物會造成輕微損傷,操作時宜輕巧、敏捷,必要時麻醉,以減少痛苦。由于不符合動物福利倫理,現(xiàn)在已經(jīng)不使用了。
(四)掛牌法
掛牌法是將編好的號碼烙印在金屬牌上,掛在實驗動物頸部、耳部、肢體或籠具上,用來區(qū)別實驗動物的一種方法。金屬牌應(yīng)選用不生銹、刺激小的金屬材料,制成輕巧、美觀的小牌子。
(五)文身法
文身(英文to tattoo ),也可以寫做文身,又叫刺青,是用帶有顏色的針刺入皮膚底層而在皮膚上制造一些圖案或字眼出來。動物紋身就是給動物刺青。用針頭蘸取少量碳素墨水,在嚙齒動物耳部、前后肢自己尾部等處刺入皮下,在受刺部位留有黑色標(biāo)記。
對于非嚙齒動物,可使用電動加墨器在動物耳內(nèi)側(cè)血管不走行的部位或前胸被毛較少的部分印上墨汁。進(jìn)行此操作時動物應(yīng)進(jìn)行麻醉。此法優(yōu)點是簡便、可終身標(biāo)記。
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(六)剪趾編號法
優(yōu)點:成本低 缺點:動物倫理,許多機(jī)構(gòu)已限制使用。
(七)電子芯片法
向動物的頸背部皮下埋入預(yù)先編號號碼的微型集成電路片,用掃描儀讀取數(shù)據(jù)。掃描儀存儲的數(shù)據(jù)可拷貝到計算機(jī)上,方便進(jìn)行分析。較先進(jìn)的一種芯片可以同時讀出動物的編號和提問,可隨時監(jiān)測動物的體溫變化。
優(yōu)點:記錄簡便可測動物體溫
缺點:微芯片比較昂貴、編號由制作商決定、可能誘發(fā)腫瘤