細(xì)胞融合儀

歐盟生物實(shí)驗(yàn)室設(shè)備與維護(hù)集團(tuán)(Biologica lLaboratory Equipment, Maintenance and Service Ltd.簡(jiǎn)稱(chēng)：BLS), BLS公司是歐洲一家專(zhuān)業(yè)生產(chǎn)電融合設(shè)備的廠家，尤其在胚胎干細(xì)胞的電融合上面更具有*的技術(shù)。BLS產(chǎn)品的用戶遍布，用我們的設(shè)備發(fā)表的文章每年多達(dá)數(shù)百篇。在CELL，NATURE以及NUCLEARACID等專(zhuān)業(yè)雜志上經(jīng)常可以見(jiàn)到BLS矯健的身影。其提供的大量文獻(xiàn)與PROTOCOL給用戶的科研工作帶來(lái)極大的方便。

核移植是將細(xì)胞核從供體轉(zhuǎn)入受體的過(guò)程。細(xì)胞核指導(dǎo)胚胎的發(fā)育，導(dǎo)致新生體安全出生。在這個(gè)過(guò)程中，電融合用于將供體細(xì)胞與受體卵細(xì)胞融合，并進(jìn)一步激活細(xì)胞分裂，形成胚胎。Meng等人(1997)將核移植技術(shù)擴(kuò)展至靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物模型，克隆出恒猴。技術(shù)的進(jìn)步使研究人員能夠從分裂球進(jìn)展至更高分化的胚胎細(xì)胞以及靜止的胚兒細(xì)胞，作為核的供應(yīng)來(lái)源。胚胎產(chǎn)生的細(xì)胞在體外培養(yǎng)6-13代，然后在轉(zhuǎn)入前使用血清饑餓的方法使細(xì)胞靜止。

如前文所述，Roble、Cibelli以及Stice是*次在1998年報(bào)告使用非老化胚成纖維細(xì)胞作為核的供體進(jìn)行核移植而產(chǎn)生綿羊克隆轉(zhuǎn)基因牛的人。IanWilmut在1996年震驚了整個(gè)世界，他從成年乳腺的細(xì)胞產(chǎn)生出*個(gè)動(dòng)物克隆——多利。使用分化的成年細(xì)胞進(jìn)行克隆的能力打開(kāi)了核移植廣泛運(yùn)用的大門(mén)即基因治療的令人激動(dòng)的模式。zui近的成功事例PPLTherapeutics公司從成年體細(xì)胞克隆出豬。對(duì)于這些用途可以使用多種細(xì)胞融合樣品池及微型載玻片。

CF-150B胚胎細(xì)胞融合儀器和相關(guān)電極槽(GSS-250)專(zhuān)為哺乳動(dòng)物胚胎分裂球電融合而設(shè)計(jì)，可在電解液或非電解液中運(yùn)用。一個(gè)適當(dāng)導(dǎo)向的短電脈沖施加在早期胚胎可以溶解細(xì)胞膜，從而完成細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核融合。此儀器的主要應(yīng)用是產(chǎn)生小鼠四倍體胚胎產(chǎn)生和體細(xì)胞核轉(zhuǎn)移克隆。標(biāo)準(zhǔn)的雙細(xì)胞分裂期胚胎能夠迅速地融入單個(gè)細(xì)胞(單細(xì)胞分裂期四倍體胚胎)。這種四倍體胚胎可用于與遺傳控制小鼠胚胎干細(xì)胞(ES)聚合，從而產(chǎn)生*的ES衍生細(xì)胞胎兒(Nagyetal.,1990;NagyandRossant;1993)。

　　3、zui近，gene-trap戰(zhàn)略用于衍生ES胚胎聚合，此胚胎由ES四倍體細(xì)胞胚胎產(chǎn)生，從而獲取基因表達(dá)模式的直接信息

CF-150B細(xì)胞融合儀和專(zhuān)業(yè)設(shè)計(jì)的高精度電極槽一起使用。槽有三種不同的縫間隙，250µm,500µm和1000µm，型號(hào)名分別為GSS-250,GSS-500和GSS-1000。在做雙細(xì)胞期分裂球融合時(shí)，任何一種槽均可使用。如果用于克隆目的，我們推薦GSS-250。電極材料是高品質(zhì)不銹鋼的，并將其安置在一種厚玻璃中。所有這些材料具有生物安全性，無(wú)毒。

CF-150B和專(zhuān)業(yè)設(shè)計(jì)的電極夾GSH-1一起使用.此“快速夾"設(shè)計(jì)使得電極牢固夾在組織培養(yǎng)板(或其蓋上)。在融合過(guò)程中不會(huì)有偶然的滑動(dòng)，并且給電極線提供了的良好接觸。電極夾可用于三種里任何一種電極GSS-250,GSS-500orGSS-1000。

CF-150B和新型設(shè)計(jì)的聚合針DN-10一起使用.在組織培養(yǎng)板底部形成一個(gè)小凹陷以便小胚胎的聚集，例如胚胎、ES細(xì)胞塊以及移植早期的鼠胚胎。和附件球一起使用，這些針頭更符合人體動(dòng)力學(xué)，在使用中減少手指和手的壓力。

CF-150B和聚合針頭DN-09一起使用.聚合針DN-09是zui初設(shè)計(jì)的聚合針頭，在組織培養(yǎng)板底部形成一個(gè)小凹陷以便小胚胎的聚集，例如胚胎、干細(xì)胞以及移植早期的鼠胚胎。

如果所有參數(shù)都選擇*(*按照BLS的protocol)，融合率將高于90%，胚胎在融合過(guò)程中死亡率低于10%，并且24小時(shí)內(nèi)至少80%成功融合的胚胎將成長(zhǎng)為健康的四細(xì)胞期胚胎。